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HE染色實驗時需要注意什么？
發(fā)布時間： 2021-03-29 點擊次數(shù)： 1949次HE染色實驗簡稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術(shù)方法。HE染色實驗步驟：一般包含取材固定，脫水透明，浸蠟包埋，切片與貼片，脫蠟染色，脫水透明，封固等步驟。HE染色實驗時的注意事項：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進行，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不*，應(yīng)將切片退回*，更換酒精、二甲苯，以求*脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、zui后封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當(dāng)，樹脂封固時不能有氣泡。
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